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BODIPY 665/676脂质过氧化荧光探针
简要描述:
BODIPY 665/676脂质过氧化荧光探针高亲和力结合游离脂肪酸和甘油三酯,具有长波长的最大吸收波长(λex=665nm)和最大荧光发射波长(Em=676nm)[1]。
产品时间:2024-03-29
BODIPY 665/676 脂质过氧化荧光探针
产品关键词
BODIPY 665/676;C11 BODIPY 581/591;Lipid Peroxidation Sensor;脂质过氧化感受器;铁死亡(Ferroptosis);FeRhoNox-1 (Fe2+ indicator) 亚铁离子荧光探针;
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
BODIPY 665/676脂质过氧化荧光探针 | MX5212-5MG | 5mg | 3593 |
产品描述
BODIPY 665/676是一种亲脂性荧光探针,高亲和力结合游离脂肪酸和甘油三酯,具有长波长的最大吸收波长(λex=665nm)和最大荧光发射波长(Em=676nm)[1]。与常用的脂质过氧化探针C11 BODIPY 581/591(MX5211-1MG)相似,BODIPY 665/676容易被过氧化自由基氧化,一旦氧化,最大发射波长迁移到605nm(λex =580 nm)[2-4]。BODIPY 665/676最重要的优势在于发射波长是676nm,与绝大部分的荧光素之间无交叉,从而能避免比如自荧光的干扰。BODIPY 665/676具热稳定和高度疏水性特征,从而不会扩散出脂滴。激发器642nm与最大吸收波长665nm接近,由此,在很低的探针浓度下就能得到强荧光信号[5]。
产品特征
1) 同义名:(E,E)-3,5-bis-(4-phenyl-1,3-butadienyl)-4,4-difluoro-4-bora-3a,4a-diaza-s-indacene
-3,5-双-(4-苯基-1,3-丁二烯基)-4,4-二氟-4-硼拉-3a,4a-二氮杂-s-二茚
2) 分子量:448.32
3) 外观:蓝色固体
4)激发波长:665nm
5)发射波长:676nm
保存与运输方法
保存:-20ºC避光干燥保存,收到货至少12个月有效。
运输:冰袋运输。
注意事项
1) 整个染色过程中需注意避光。
2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法(活细胞成像分析)
1. 染色工作液的准备
1.1 储存液的制备:将低温保存的BODIPY 665/676干粉从冰箱取出后置于室温至少20min,低速离心后,加入高质量DMSO配制成适宜浓度的储存液,比如:10mM储存液(即:往5mg BODIPY 665/676加入1.1153ml DMSO,充分溶解后混匀即可),根据单次用量分装,≤-20℃保存,尽量避免反复冻融。
2. 染色步骤
3. 图像处理和分析
应用示例(来自文献,仅做参考)
1) 为了测定脂质过氧化(Lipid Peroxidation),MDA-MB 231细胞加入BODIPY 665/676(5 μM)孵育30 min。用PBS清洗细胞两次以去除多余的染料。用VariosKan酶标仪测定荧光值,结果以荧光强度(AU)来展示。【文献来源】:Consoli V, Sorrenti V, Pittalà V, Greish K, D'Amico AG, Romeo G, Intagliata S, Salerno L, Vanella L. Heme Oxygenase Modulation Drives Ferroptosis in TNBC Cells. Int J Mol Sci. 2022 May 20;23(10):5709. doi: 10.3390/ijms23105709. PMID: 35628518; PMCID: PMC9143660.
Fig 1. (A) Fluorescence images of JC-1 staining after 8 h of treatment. (B,C) Evaluation of treatment effects on mitochondrial membrane potential and lipid ROS accumulation (* p < 0.05, ** p < 0.005, vs. CTRL; ## p < 0.005, ### p < 0.0005 vs. erastin). The results are expressed as means ± SEM.
2) 为了评估中性脂滴含量和脂质过氧化,细胞用BODIPY 665/676(1μg/ml)于37℃孵育30 min。孵育结束后,细胞用FACSCalibur流式细胞仪分析。【文献来源:Canonico B, Cesarini E, Salucci S, Luchetti F, Falcieri E, Di Sario G, Palma F, Papa S. Defective Autophagy, Mitochondrial Clearance and Lipophagy in Niemann-Pick Type B Lymphocytes. PLoS One. 2016 Oct 31;11(10):e0165780. doi: 10.1371/journal.pone.0165780. PMID: 27798705; PMCID: PMC5087958.】
图 2. 图 6. 通过 BODIPY® 665/676 (BP) 评估细胞内脂质含量和脂肪自噬。(A) 单共焦光学切片(约 0.8 μm 厚度),显示来自对照、营养剥夺和雷帕霉素处理的 tWT 和 tNP 细胞的 LTG(绿色)和 BP(红色)的叠加以及与明场 (BF) 的相对合并。插图显示脂滴与细胞外表面结合,可能是新从细胞中挤出的,或者就在外细胞膜下方,最有可能被细胞胞吐。条形:10μm;插图为 5 μm。(B) 用于对照、营养剥夺和雷帕霉素施用的对照和病理细胞中 LTG 和 BP 的皮尔逊共定位系数 (PCC)。皮尔逊系数源自三个wan全独立的实验,每个实验超过 10 个字段对累积结果有贡献。各值表示为PCC±SD;**与相应对照相比,P < 0.01。通过双向方差分析确定细胞系之间的差异显着(***P < 0.001)。
3)为了测定脂质氧化(lipid Peroxides),细胞用总内皮细胞处理,之后用BODIPY 665/676(2μg/ml)于37℃孵育30 min。之后上流式,用FlowJo 10.0.0软件进行数据分析。【文献来源:Rodrigues, J., Wang, YF., Singh, A. et al. Estrogen enforces the integrity of blood vessels in the bone during pregnancy and menopause. Nat Cardiovasc Res 1, 918–932 (2022). h**ttps*://;doi.org/10.1038/s44161-022-00139-0】
参考文献
1] Canonico B、Cesarini E、Salucci S、Luchetti F、Falcieri E、Di Sario G 等。(2016) Niemann-Pick B 型淋巴细胞中的自噬、线粒体清除和脂噬缺陷。《公共科学图书馆 ONE》11(10):e0165780。[2] Meyer W、Schmidt J、Busche R、Jacob R、Naim HY。皮肤材料塑料树脂嵌入部分中脂质的演示。J 显微镜。2009年;233:5-9。pmid:19196406 [3] Raudsepp P、Brüggemann DA、Andersen ML。使用亲脂性荧光探针 BODIPY(665/676) 和共焦激光扫描显微镜检测水包油乳液单滴中的自由基。自由基生物医学。2014 年 5 月;70:233-40。doi:10.1016/j.freeradbiomed.2014.02.026。Epub 2014 年 3 月 12 日。PMID:24631488。[4] Raudsepp P、Brüggemann DA、Andersen ML。通过探针 (E,E)-3,5-双(4-苯基-1,3-丁二烯基)-4,4-二氟-4-硼酸检测到水包油乳液液滴之间自由基转移的证据-3a,4a-二氮杂-s-indacene,BODIPY(665/676.)。农业食品化学杂志。2014 年 12 月 24 日;62(51):12428-35。DOI:10.1021/jf50440
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